استاد راهنما :
آقاي دكتر مصطفي عبادي

استاد مشاور:
خانم دكتر بستان رودي

تكه هايي از متن به عنوان نمونه :
فهرست مطالب
عنوان                           صفحه
فصل اول: كليات تحقيق
۱-۱ مقدمه. ۲
۱-۲ اهداف پژوهش. ۳
۱-۳ مشخصات گياهشناسي اطلسي ۳
۱-۴ شرايط كاشت اطلسي ۵
۱-۵ فلزهاي سنگين ۵
۱-۵-۱ كادميوم. ۵
۱-۵-۱-۱ اثرات كادميوم بر روي سلامتي ۶
۱-۵-۱-۲ اثرات زيست محيطي كادميوم ۷
۱-۵-۲ كبالت. ۸
۱-۵-۲-۱ اثرات كبالت بر سلامتي انسان. ۹
۱-۵-۲-۲ تاثيرات زيست محيطي كبالت. ۱۱
۱-۶ كشت بافت. ۱۲
۱-۷ ريزازديادي ۱۳
۱-۸ كاربرد‌هاي تجاري ريزازديادي ۱۴
۱-۹ كشت بافت و مهندسي ژنتيك گياهي ۱۵
فصل دوم: مروري بر منابع
2-1- فلزهاي سنگين ۱۷
۲-۱-۱ تأثير فلزهاي سنگين بر روي گياهان. ۱۷
فصل سوم: مواد و روش­ها
3-1- تهيه ي محلول هاي ذخيره و محيط كشت. ۳۵
۳-۱-۱- محلول هاي مادري نمك هاي پرمصرف با غلظت ۱۰ برابر (۱۰×) ۳۵
۳-۱-۲- محلول هاي مادري نمك هاي كم مصرف با غلظت ۱۰۰۰ برابر (۱۰۰۰×) ۳۶
۳-۱-۳- محلول مادري و با غلظت ۱۰ برابر (۱۰×) ۳۷
۳-۱-۴- محلول مادري با غلظت ۱۰۰۰ برابر (۱۰۰۰×) ۳۷
۳-۱-۵- محلول مادري ويتامين ها و گلايسين ۱۰۰ برابر (۱۰۰×): ۳۸
۳-۱-۶ محلول مادري هورمون ها ۳۸
۳-۱-۶-۱ اكسين‌ها ۳۸
۳-۱-۶-۲ سيتوكينين‌ها ۳۸
۳-۱-۷- تهيه CdCl₂براي تيمار. ۳۹
۳-۱-۸ تهيه يك ليتر محيط كشت پايه MS از محلول هاي مادري ۳۹
۳-۱-۹ عامل ژله اي .۴۰
۳-۲ روش تهيه گياه پايه استريل ۴۰
۳-۲-۱مراحل سترون سازي ۴۰
۳-۲-۱-۱ سترون سازي بذرها ۴۰
۳-۲-۱-۲- سترون سازي محيط وسايل كار. ۴۰
۳-۳ توليد گياهان سترون جهت تيمارهاي مختلف. ۴۱
۳-۴ كشت گياه در محيط هاي تيماري ۴۱
۳-۵ آناليز رشد. ۴۲
۳-۶ سنجش رنگيزه هاي فتوسنتزي (۱۹۵۷ Arnon,): 44
3-7 سنجش كربوهيدراتها (۱۹۷۸ Kochert,): 45
3-7-1 اندازه گيري قندهاي محلول. ۴۵
۳-۷-۲ اندازه گيري قندهاي نامحلول (نشاسته) ۴۶
۳-۸ سنجش پرولين ( Bates et al , 1973) 47
3-9 سنجش فعاليتهاي آنزيمي ۴۸
۳-۹-۱ سنجش آنزيم پراكسيداز (۱۹۸۹ Koroi, ) 48
3-9-2 سنجش آنزيم كاتالاز (۱۹۵۵ Chance, ) 49
3-10 سنجش پروتئين ها , ۱۹۵۱).Lowry et al) 49
فصل چهارم: نتايج
4-1 اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كبالت بر رشد جدا كشت‌هاي دو گره‌اي ۵۳
۴-۲- اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كادميوم بر رشد جدا كشت‌هاي دو گره‌اي۵۴
۴-۳ نتايج مربوط به اثرات غلظت‌هاي مختلف كلريد كبالت و كلريد كادميوم بر گياه اطلسي (Petunia hybrida) پس از انتقال به محيط پايه MS 56
4-3-1 تغييرات شاخص‌هاي رشد در گياه ۳۵ روزه تحت تيمارهاي مختلف كلريد كادميوم و كلريد كبالت. ۵۶
۴-۳-۱-۱ تغييرات وزن تر اندام هوايي ۵۶
۴-۳-۱-۲ تغييرات طول ساقه. ۵۷
۴-۳-۱-۳ تغييرات وزن خشك اندام هوايي ۵۹
۴-۳-۱-۴ تغييرات سطح برگ‌ها۶۱
۴-۳-۱-۵ تغييرات تعداد برگ. ۶۴
۴-۳-۱-۶ تغييرات فاصله ميانگرهي ۶۶
۴-۳-۱-۷ تغييرات وزن تر كل برگ‌ها ۶۶
۴-۳-۱-۸ تغييرات وزن خشك كل برگ‌ها ۶۷
۴-۳-۱-۹ سرعت رشد گياه (C.G.R): 67
4-3-1-10 وزن مخصوص برگ (SLW): 68
4-3-1-11 سرعت رشد نسبي (RGR): 68
4-3-1-12 ميزان جذب خالص (N.A.R) 69
4-3-1-13 نسبت سطح برگي (L.A.R)71
4-3-1-14 تغيرات ميانگين نسبت سطح ويژه برگي (S.L.A) 73
4-4-2 تغيرات بيوشيميايي ۷۵
۴-۴-۲-۱ تغييرات مقدار كلروفيل ها: ۷۵
۴-۴-۲-۲ تغييرات فعاليت آنزيم ها: ۸۰
۴-۴-۲-۲-۱ تغييرات مقدار فعاليت آنزيم كاتالاز در اندام هوايي: ۸۰
۴-۴-۲-۲-۲ تغييرات مقدار فعاليت آنزيم پراكسيداز در اندام هوايي: ۸۲
۴-۴-۲-۳ تغييرات مقدار قندهاي محلول و نامحلول كل اندام هوايي: ۸۴
۴-۴-۲-۴ تغييرات ميزان پروتئين هاي كل اندام هوايي: ۸۷
۴-۴-۲-۵ تغييرات مقدار پرولين اندام هوايي: ۸۹
فصل پنجم: بحث و نتيجه گيري
5-1 نتيجه گيري و پيشنهادات  92
5-2 اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كادميوم و كلريد كبالت بر روي رشد گياه ۹۲
۵-۳ اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كبالت و كلريد كادميوم بر ميزان كلروفيل‌ها ۹۵
۵-۴ اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كبالت و كلريد كادميوم بر ميزان پروتئن‌هاي كل گياه ۹۸
۵-۵ اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كبالت و كلريد كادميوم بر ميزان پرولين در گياه اطلسي ۹۸
۵-۶ اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كبالت و كلريد كادميوم بر ميزان فعاليت آنزيم‌هاي كاتالاز و پراكسيداز ۱۰۰
۵-۷ اثر غلظت‌هاي مختلف كلريد كبالت و كلريد كادميوم بر ميزان قند محلول و نامحلول در گياه اطلسي. ۱۰۱
۵-۸ نتيجه‌گيري كلي۱۰۲
۵-۹ پيشنهادات۱۰۴
منابع. .۱۰۵
منابع فارسي ۱۰۶
منابع لاتين ۱۰۸
پيوست ها۱۱۵
چكيده
در اين تحقيق اثر غلظت هاي مختلف كادميوم و كبالت بر روي گياه اطلسي بررسي شد .گياه اطلسي (Petunia hybrida L. ) ، عضوي از خانواده ي Solanaceae محسوب مي شود كه بومي آمريكاي جنوبي بوده و به عنوان يك محصول پرورشي گل زينتي و صادراتي با ارزش شناخته مي شود .
ابتدا گياهان اطلسي در محيط هاي كشت آگار (محيط كشت MS) كشت داده شدند و بعد جدا كشت هاي ساقه اي اطلسي به محيط هاي حاوي غلظت هاي مختلف كلريد كادميوم ( mmol/L 049/0 ، ۰۲۱/۰ ، ۰۱/۰ ، ۰) و كلريد كبالت mmol/L) 38/0 ، ۱۹/۰ ، ۱۲/۰ ، ۰۹۶/۰ ، ۰ ) منتقل شده و بعد از ۳۵ روز تاثيرهاي اين عناصر ، از نظر مرفولوژي و فيزيولوژي بررسي شد .
در مورد كادميوم ، مشاهده شد كه با افزايش غلظت هاي CdCl₂، مقدار كلروفيل كاهش چشمگيري را نشان داد . هم چنين با افزايش غلظت CdCl₂ شاهد افزايش مقدار پرولين ، پروتئين و قندهاي محلول و نامحلول بوديم . با افزايش غلظت اين فلز ، آنزيم هاي پراكسيداز و كاتالاز هم فزايش يافتند . هم چنين غلظت هاي بالاي كادميوم ( مخصوصا ۰۲۱/۰ و ۰۴۹/۰ ميلي مول بر ليتر ) باعث بي رنگي برگ هاو كاهش وزن تر و خشك و اندازه سطح برگ شد . گياهاني كه در معرض غلظت هاي بالاي CdCl₂ بودند ، رشد بسيار كمتري داشتند نسبت به گياهان فاقد CdCl_{2 . (} گياه هاي اطلسي در محيط هاي فاقد CdCl₂ ، حدود ۳/۹ سانتي متر رشد كرده بودند ، در حالي كه اطلسي هاي حاضر در mmol/L049/0 كادميوم ، رشدي در حدود ۳/۱ سانتي متر را نشان دادند ).
كبالت در غلظت هاي پايين (۰۹۶/۰ميلي مول بر ليتر) باعث افزايش كلروفيل شده ولي در غلظت هاي بالاتر ( ۳۸/۰ ميلي مول بر ليتر ) ، شاهد كاهش كلروفيل بوديم . با افزايش غلظت هاي كبالت ، آنزيم هاي كاتالاز و پراكسيداز افزايش يافتند و مقدار پرولين ابتدا كاهش و بعد افزايش چشمگيري را نشان داد ( مقدار پرولين در غلظت ۰۹۶/۰ ميلي مول بر ليتر كاهش يافت ولي بعد از آن شاهد افزايش پرولين بوديم ) . علاوه بر اين موارد ، افزايش غلظت هاي CoCl₂ ، باعث كاهش مقدار پروتئين و قندهاي نا محلول شده ولي مقدار قندهاي محلول افزايش يافت . هم چنين با افزايش غلظت كبالت شاهد كاهش رشد و كاهش تعداد شاخه ها بوديم ، به طوري كه نمونه هاي فاقد CoCl₂ ، تعداد شاخه هاي بيشتري را نشان مي دادند و سطح برگ هم نسبت به افزايش كبالت رشد منفي را نشان مي داد . علاوه بر اين موارد با افزايش غلظت CoCl₂ شاهد كاهش وزن تر و خشك اطلسي بوديم.
كليد واژه : CdCl₂ ، CoCl₂ ، اطلسي ، كشت بافت
۱-۱ مقدمه
گياهان از جمله زيباترين آفريده‌هاي خالق هستي‌اند كه تنوع و رنگارنگي آنها روح را آرامش و هر واقع بيننده اي را به شگفتي و تفكر وا مي‌دارد. گل اطلسي با نام علميL. Petunia hybrida از خانواده Solanaceae است. دو رگه‌هاي گوناگون از اين جنس با گل‌هاي درشت، زيبا، به رنگ‌هاي گوناگون به دست آمده است كه بي‌نهايت مورد توجه گلكاران مي‌باشد (مرتضايي‌نژاد، ۱۳۸۳).
اطلسي داراي رقم‌هاي يك ساله و دائمي بوده و منشاء آن آرژانتين، برزيل و اروگوئه است. در گلكاري از اكثر رقم‌هاي آن حتي رقم‌هاي دائمي به صورت يك ساله استفاده مي‌شود. گل اطلسي داراي رنگ‌هاي متنوع است. اين گل‌ها داراي ساقه‌هاي نيمه چوبي و گل‌هاي قيف مانند است. انواع كم‌پر و پرپر دارد كه نوع كم پر آنرا به عنوان اطلسي معمولي مي‌شناسيم و بيشتر در حاشيه‌كاري و