پايان نامه براي دريافت درجه كارشناسي ارشد‹‹M.Sc.››رشته مهندسي كشاورزي علوم و صنايع غذايي- گرايش مهندسي علوم و صنايع غذايي
عنوان
جداسازي و شناسايي سروتيپ هاي سالمونلاهاي جدا شده از تخم مرغ هاي بومي و صنعتي استان مازندران با بهره گرفتن از PCR
استاد راهنما
آقاي دكترحسين جلالي
استاد مشاور
آقاي دكترهاتف آجوداني فر
تكه هايي از متن به عنوان نمونه :
فهرست مطالب
عنوان صفحه
چكيده 1
- فصل اول : مقدمه و هدف
۱-۱. مقدمه ۳
1-2. هدف . ۱۸
- فصل دوم : كليات
۲-۱. پيشينه تحقيق ۲۰
2-2. ساختمان و ارزش غذايي تخم مرغ. ۳۰
۲-۳. نحوه نگهداري و ذخيره سازي تخم مرغ ۴۷
۲-۴. انواع درجه بندي تخم مرغ. ۴۸
۲-۵. مكانيسم هاي دفاعي تخم مرغ ۴۸
۲-۶. ميكروبيولوژي تخم مرغ. ۵۲
۲-۷. باكتري سالمونلا ۵۳
- فصل سوم: مواد وروش ها
۳-۱. وسايل و مواد مورد استفاده ۶۷
۳-۲. روش كار ۶۹
۳-۲-۲. آماده سازي محتويات نمونه هاي تخم مرغ جهت كشت باكتريايي ۷۲
۳-۲-۶ . مرحله تاييد ۷۴
۳-۲-۶-۳ . آزمون هاي سرولوژيكي ۷۷
۳-۲-۶-۳-۱ . حذف سوش هاي خودآگلوتينه ۷۷
۳-۲-۶-۳-۲ . آزمون براي تشخيص وجود آنتي ژن O,Vi,H 78
3-2-6-4. تفسير نتايج واكنش هاي سرولوژيكي و بيوشيميايي ۷۸
۳-۲-۶-۵ . استفاده از واكنش زنجيره اي پليمراز(PCR) 78
3-2-6-5-6: رسم درخت فيلوژني. ۸۴
۳-۳. روش هاي آماري آناليز يافته ها ۸۵
- فصل چهارم: نتايج تحقيق
۴-۱. نتايج ۸۵
۴-۱-۵ . نتايج تست هاي بيوشيميايي ۹۰
۴-۱-۶. نتايج آزمون هاي سرولوژيكي. ۹۱
۴-۱-۷. نتايج آزمون PCR 91
4-1-8 . نتايج ميزان آلودگي تخم مرغ هاي بومي و ماشيني استان مازندران . ۹۶
۴-۱-۸-۲. نتايج آزمون هاي آماري آلودگي تخم مرغ هاي بومي و ماشيني شهرستان ها. ۹۶
- فصل پنجم: بحث و نتيجه گيري
۵-۱. بحث. ۱۰۶
۵-۲. نتيجه گيري. ۱۰۹
۵-۳. پيشنهادات ۱۱۰
منابع 111
پيوست. ۱۱۹
چكيده انگليسي. ۱۲۳
چكيده
سابقه و هدف
تخم مرغ و محصولات تخم مرغ آلوده يكي از منابع مهم بيماري هاي ناشي از غذا مثل سالمونلوسيس است. سالمونلوسيس يكي از عمده ترين و وسيع ترين بيماري ناشي از غذا در سرتاسر جهان است، در هر سال ميليون ها مورد انساني در تمام دنيا گزارش مي شود، و در هزاران نفر منجر به مرگ مي شود. تحقيق حاضر با هدف تعيين ميزان آلودگي تخم مرغ هاي مصرفي بومي و ماشيني استان مازندران به باكتري سالمونلا انجام شد.
روش تحقيق
در اين مطالعه توصيفي مقطعي،ازاوخر فروردين۹۱ تا اوايل مرداد۹۱، تعداد۲۰۰ عدد تخم مرغ بومي و ۵۶ عدد تخم مرغ ماشيني از سطح استان مازندران جمع آوري و محتويات آن ها از نظر آلودگي سالمونلايي مورد بررسي قرار گرفتند. تخم مرغ هاي بومي و ماشيني هر يك پس از مخلوط كردن به طور جداگانه درون ۴۵ ميلي ليتر محيط پپتون واتر اضافه شدند، در ادامه بر اساس روش هاي كشت استاندارد عمل جداسازي صورت گرفت و بر روي تمامي باكتري هاي جدا شده از محيط هاي كشت افتراقي، آزمايشات دقيق بيوشيميايي انجام شد، سپس جهت تشخيص قطعي سالمونلا از آزمون هاي سرولوژيكي و PCR استفاده شد.
يافته ها
پس از انجام مراحل كشت، از مجموع ۲۰۰ عدد تخم مرغ بومي مورد بررسي، يك عدد تخم مرغ مشكوك به باكتري سالمونلا يافت شد كه بعد از انجام آزمون PCR مشخص شد كه متعلق به گونه سيتروباكتر فروندي است و در۵۶ عدد تخم مرغ هاي ماشيني هيچ يك از تخم مرغ ها به باكتري سالمونلا آلوده نبودند، همچنين مشاهده شد كه از مجموع ۵۶ عدد تخم مرغ ماشيني۳/۵% تخم مرغ ها به باكتري اشرشيا و ۷/۱% به باكتري سيتروباكتر آلوده بودند و همچنين ۵/۶% تخم مرغ هاي بومي به باكتري اشريشيا، ۵/۲% به باكتري كلبسيلا، ۵/۱% به باكتري شيگلا و ۹% به باكتري سيتروباكتر آلوده بودند.
نتيجه گيري
با توجه به نتايج بدست آمده، در هيچكدام از نمونه تخم مرغ هاي بومي و ماشيني مصرفي استان مازندران در اين تحقيق آلودگي سالمونلايي مشاهده نشده است، ولي آلودگي محتويات تخم مرغ هاي بومي و ماشيني به باكتري هاي ديگر مشاهده شده است كه لازم است اقدامات بهداشتي بيشتري در اين مناطق صورت گيرد.
واژه هاي كليدي: تخم مرغ ، سالمونلا، سالمونلوسيس، گاستروانتريت
۱-۱. مقدمه
۱-۱-۱. خصوصيات تخم مرغ
تخم مرغ يك غذاي پايه اي داراي اهميت براي ميليون ها نفر در سرتاسر دنيا است(۳۱). از پرزرده ترين تشكيلات ياخته تناسلي در حيوانات تخمگذار است(۱۲). تخم مرغ به خاطر استفاده راحت يكي از پرمصرف ترين مواد غذايي مورد استفاده انسان است(۱۲). يكي از كامل ترين منابع غذايي حيواني براي انسان و در صورت لزوم حيوانات به شمار مي رود كه خلقت آن را به عالي ترين وجه و شكل ممكن بسته بندي نموده است(۱۲).
تخم پرندگان يكي از غذاهاي معمول و همچنين يكي از متنوع ترين مواد غذايي است كه در آشپزي مورد استفاده قرار مي گيرد و رايج ترين مورد استفاده از تخم پرندگان، تخم مرغ است. اما تخم ديگر پرنده ها مثل شترمرغ، اردك، بلدرچين نيز توسط انسان ها مصرف مي شوند. تخم ها معمولا به صورت تخم با پوسته فروخته و مصرف مي شوند، براي مصارف تجاري و در سرويس هاي آماده سازي غذاها تخم ها از پوسته شكسته مي شوند و سپس ممكن است به طور كامل يا به صورت زرده و سفيده جدا مصرف شوند(۶۶).
تخم مرغ ها يك منبع خوبي از پروتئين هاي با كيفيت بالا هستند. آن ها تامين كننده منابع خوبي از آهن، ويتامين ها و فسفوروزها هستند. به عنوان يك منبع مغذي از ويتامين D و در رتبه دوم بعد از روغن كبد ماهي هستند. تخم مرغ ها مقدار كلسيم كمي دارند كه در پوسته يافت مي شود و حاوي مقدار كمي از ويتامين C هستند(۶۵).
تخم مرغ ها تامين كننده يك منبع مغذي متعادل و خوب براي بشر در همه سن ها هستند، زرده تخم مرغ خيلي پخته شده يك حجم مغذي بزرگي به عنوان منبع تكميلي بالاي آهن براي بچه ها است و زماني كه بچه ها به سن يك سالگي مي رسند ممكن است به آن ها سفيده تخم مرغ بدهند. حجم كالري كم، قابليت هضم آسان و حاوي مواد مغذي بالا، تخم مرغ ها را به عنوان يك ماده گرانبها در رژيم هاي درماني براي افراد مسن ساخته است. در دوران نقاهت هنگامي كه يك رژيم غذايي ملايم مورد نياز است تخم مرغ ها يك رژيم غذايي مطلوب را فراهم مي كنند(۶۵).
تخم مرغ يك منبع بالقوه خوب از مواد خام براي صنايع دارويي و آرايشي است. همچنين به طور وسيعي در صنايع غذايي استفاده مي شود. تخم مرغ نقش مخمر، غليظ كننده و چسباننده مواد را داراست كه از جمله در سس هايي مانند سس مايونز استفاده مي شود. در ساير موارد از جمله در غذاها و در دسرهاي مخصوص و در انواع كرم ها كه از تنوع بالايي برخوردارند، مصرف شده و به آن ها لطافت خاصي مي بخشد. در رأس همه اين نقش هاي پنهان، اين ماده غذايي به تنهايي نيز مغذي و خوشمزه است خواه به صورت آب پز، نيمرو يا به صورت انواع املت ها باشد(۵۷).
تخم مرغ با داشتن مقدار متوازني از غني ترين مواد پروتئيني، چربي، كربوهيدرات، مواد معدني، ويتامين ها طي بيست روز دوران زندگي جنيني تنها منبع تامين غذاي جنين اين موجود مي باشد(۱۲).